山羊骨骼肌特异性基因α-actin启动子驱动的Fat-1表达载体及其构建方法

摘要

试验旨在构建山羊骨骼肌特异性基因α-actin启动子驱动的Fat-1表达载体。将Fat-1基因克隆入pEGFP-N1载体,构建成为pEGFPN1-Fat-1载体;插入CMV增强子和骨骼肌特异性基因α-actin启动子,构建成为α-actin promoter-pEGFPN1-Fat-1表达载体;最后通过流式细胞仪检测转Fat-1基因对山羊耳成纤维细胞周期和凋亡的影响。双酶切和测序证实,已成功构建了肌肉组织特异性表达载体α-actin promoter-pEGFPN1-Fat-1;与对照组相比,转Fat-1基因促进羊耳成纤维细胞增殖,抑制凋亡。试验结果为动物转基因工程的研究和应用提供了参考依据。