阻断EGFR和mTOR信号通路对C6胶质瘤及其干细胞的影响

摘要

目的探讨埃罗替尼(Erlotinib)和雷帕霉素(Rapamycin)抑制胶质瘤细胞增殖的可能机制,为胶质瘤靶向治疗提供新思路。方法采用无血清培养基培养C6细胞,获取C6胶质瘤干细胞(GSCs),细胞免疫荧光染色检测CD133和nestin鉴定胶质瘤干细胞;CCK-8、RT-PCR和Western blot检测经Erlotinib、Rapamycin干预后,肿瘤细胞增殖和细胞周期与EGFR和mTOR信号通路相关基因蛋白EGFR、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、rps6k、p-rps6k表达变化的关系。结果胶质瘤干细胞表达CD133、Nestin;Erlotinib、Rapamycin对C6及C6 GSCs均呈剂量-时间依赖性抗增殖作用(P<0.05)。Erlotinib与Rapamycin能够增加Gl期细胞比例,减少S期比例,而且C6 GSCs对Erlotinib、Rapamycin的敏感性低于C6细胞(P<0.05);用药组与空白对照组相比,细胞中EGFR和mTOR通路中相关蛋白表达明显下调(P<0.05),联合用药组效果更明显。结论胶质瘤C6细胞系中存在一定量的肿瘤干细胞;Erlotinib与Rapamycin通过阻断EGFR和mTOR抑制C6、C6 GSCs生长增殖、细胞周期。