肝素对鲎试剂检测内毒素的干扰机制: 钙/镁离子螯合和内毒素结合作用

摘要

目的 肝素作为抗凝药物,常用于临床存储血液样品中;而对肝素化血液作内毒素检测时,发现肝素对鲎试剂有干扰。方法 测定鲎试剂的蛋白组成和离子浓度、内毒素粒径及其与肝素的分子相互作用。结果 肝素浓度≥0. 500 mg/ml时,明显抑制鲎试剂对内毒素的检测,且鲎试剂酶促反应生成的凝固蛋白显著减少;加入肝素的鲎试剂中Ca^(2+)、Mg^(2+)浓度显著低于无肝素的鲎试剂,表明肝素与鲎试剂中的Ca^(2+)、Mg^(2+)发生螯合作用,从而干扰鲎试剂对内毒素的检测。另外,内毒素中加入0. 500 mg/ml肝素时,其粒径从(17. 11±0. 63) nm显著增加至(61. 99±0. 58) nm;肝素滴定内毒素时,ΔH>0且ΔH <|TΔS|,表明肝素与内毒素发生疏水结合作用。结论 肝素对鲎试剂检测内毒素的干扰机制包括Ca^(2+)、Mg^(2+)螯合和内毒素结合作用。