大叶落地生根(Kalanchoe daigremontiana)KdSOC1基因的克隆及自激活检测

摘要

大叶落地生根(Kalanchoe daigremontiana)为景天科多年生肉质草本植物,是研究无性繁殖的模式植物。SOC1 (Suppressor of overexpression of constans 1)基因是植物成花过程中MADS-box基因家族中的关键转录因子。为深入研究大叶落地生根KdSOC1基因的功能,于大叶落地生根中克隆KdSOC1基因,进行生物信息学分析,构建酵母双杂交诱饵表达载体pGBKT7-KdSOC1,并采用LiAc法将重组质粒pGBKT7-KdSOC1转化至Y2HGold酵母菌株中,通过营养缺陷型培养基培养进行自激活检测。结果表明,成功克隆了KdSOC1基因,该基因开放阅读框共有684 bp。生物信息学分析结果显示,Kd SOC1蛋白共有227个氨基酸残基,分子量为25.88 kD,大叶落地生根SOC1蛋白与牡丹的亲缘关系最为接近。双杂交诱饵表达载体pGBKT7-KdSOC1构建成功,并在酵母细胞中正常表达,表达产物对报告基因无自激活作用。本研究为筛选大叶落地生根中与其互作的蛋白及后续实验提供了帮助。