基于UPLC-Q-TOF/MS的黄连解毒汤抗动脉粥样硬化大鼠血浆代谢组学研究

摘要

目的基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)技术探讨黄连解毒汤对动脉粥样硬化大鼠血浆中内源性标志物的影响,旨在寻找差异的潜在生物标志物群,以阐释黄连解毒汤抗动脉粥样硬化的分子机制。方法将雄性SD大鼠随机分成正常对照组、模型组及黄连解毒汤低、中、高剂量组(1.5、3、6 g·kg^-1)。采用高脂饲料+定期注射维生素D3复制动脉粥样硬化模型,造模8周;从第3周开始每天灌胃给药1次,连续给药5周。造模结束后应用UPLC-Q-TOF/MS进行血浆样品的分离和数据采集,通过偏最小二乘判别分析法(PLS-DA)分析黄连解毒汤对内源性代谢物的影响;对己鉴定结构的代谢标志物通过Metabo Analyst 4.0进行代谢通路分析。结果筛选和鉴定出35个潜在生物标志物。与模型组比较,黄连解毒汤可显著上调乙内酰脲-5-丙酸、3-羟基-N6,N6,N6-三甲基-L赖氨酸、5-L-谷氨酰基-牛磺酸、3-脱氧肉毒碱、3-羟基-9Z-十八碳烯酰肉毒碱、苏氨酰亮氨酸等20个生物标志物(P <0.05,P <0.01),下调原卟啉IX、17-羟基二十二碳六烯酸、19,20-二羟基-二十二碳五烯酸、肉桂酰甘氨酸、褪黑素等10个生物标志物(P <0.05,P <0.01)。主要影响色氨酸代谢、牛磺酸和亚牛磺酸代谢、组氨酸代谢、赖氨酸降解、卟啉与叶绿素代谢等5条代谢通路;原卟啉IX、乙内酰脲-5-丙酸、3-羟基-N6,N6,N6-三甲基-L赖氨酸、5-L-谷氨酰基-牛磺酸和褪黑素等代谢物是与代谢通路密切相关的关键潜在生物标志物。结论黄连解毒汤对高脂饮食诱导的动脉粥样硬化的治疗作用可能与其改善血浆中内源性代谢物水平,恢复体内正常代谢活动有关。