基于Wnt/β-catenin信号通路研究扶肝化纤汤抑制HSC-T6活化的作用

摘要

目的探讨扶肝化纤汤抑制大鼠肝星状细胞系HSC-T6增殖的作用机制。方法健康清洁级雄性SD大鼠40只,予扶肝化纤汤等效量灌胃,制备含药血清及正常血清。CCK8法检测不同含药血清浓度(5%、8%、10%、15%、20%)对HSC-T6增殖率的影响,选择最佳作用浓度。将HSC-T6分为空白组(15%胎牛血清)、模型组[转化生长因子-β1(TGF-β1)+15%正常血清)]和治疗组(TGF-β1+15%含药血清),Western blotting、qt-PCR检测Wnt1、β-catenin、Cyclin D1蛋白和mRNA表达,细胞免疫荧光染色法检测α-SMA表达。结果镜下观察治疗组HSC-T6细胞数量减少,形态变圆,体积缩小,悬浮细胞增多。CCK8法检测结果显示,扶肝化纤汤含药血清抑制TGF-β1诱导活化的HSC-T6细胞增殖(P0.05)。Western blotting、qt-PCR检测结果显示,与模型组比较,治疗组Wnt1、β-catenin、Cyclin D1的mRNA和蛋白表达下降(P<0.01)。细胞免疫荧光染色法结果显示,模型组胞质内α-SMA表达增加,治疗组与模型组比较胞质内α-SMA表达减少。结论扶肝化纤汤含药血清可抑制HSC-T6活化增殖,降低活化后HSC-T6中Wnt1、β-catenin、Cyclin D1的蛋白及mRNA表达;扶肝化纤汤可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活从而防治HF。