双重荧光定量RT-PCR快速检测肠道病毒和水痘-带状疱疹病毒

摘要

目的建立双重荧光定量RT-PCR技术,用于同时快速检测肠道病毒(Enteroviruses,EV)和水痘-带状疱疹病毒(Varicella-Zoster virus,VZV)。方法从GenBank上下载不同年份和地区的EV和VZV基因序列,分别在其保守区域设计引物与TaqMan探针,建立优化单重和双重荧光定量RT-PCR反应体系,评价所建双重RT-PCR反应体系的特异度、敏感度和稳定性,并应用于临床标本的检测中。结果该方法对EV和VZV检测具有高度特异性,检出限分别为30 copies/μl和36copies/μl,从疑似EV/VZV患者临床标本中直接检测EV与VZV,整个操作过程仅需3 h。结论本研究建立的双重荧光定量RT-PCR方法可以同时鉴别EV与VZV,具有特异性好、灵敏度高、快速易操作等优点,适用于EV/VZV早期感染病例的快速确认以及暴发疫情的应急诊断。