PDCD4参与异甘草素诱导宫颈癌细胞凋亡的实验研究

摘要

目的研究程序性细胞死亡4(PDCD4)在异甘草素诱导宫颈癌细胞凋亡中的作用。方法宫颈癌细胞SiHa经异甘草素处理以后,MTT检测细胞增殖,计算半数抑制浓度,Western blot和qRT-PCR检测细胞中PDCD4蛋白和mRNA水平。在SiHa细胞中转染PDCD4过表达载体和阴性对照载体,用Westernblot和qRT-PCR检测细胞中PDCD4表达变化。用半数抑制浓度的异甘草素处理过表达PDCD4的SiHa细胞,MTT检测细胞增殖能力,克隆形成实验检测细胞克隆能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中活化型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)蛋白水平。结果异甘草素抑制宫颈癌细胞增殖,其半数抑制浓度为40μmol/L。40μmol/L异甘草素处理宫颈癌细胞,细胞中PDCD4 mRNA和蛋白表达水平升高。转染PDCD4过表达载体的宫颈癌细胞中PDCD4 mRNA和蛋白水平升高。过表达PDCD4或者异甘草素处理均可以降低宫颈癌细胞增殖和克隆能力,促进宫颈癌细胞凋亡和细胞中Cleaved Caspase-3蛋白表达,并且异甘草素处理过表达PDCD4宫颈癌细胞对细胞增殖、克隆能力的抑制作用更强,细胞凋亡和细胞中Cleaved Caspase-3蛋白水平更高。结论PDCD4参与异甘草素诱导宫颈癌细胞凋亡过程,PDCD4高表达能够协同异甘草素诱导宫颈癌细胞凋亡。