晚期糖基化终产物对脂肪干细胞功能、血管新生能力的影响及丹红注射液保护作用的实验研究

摘要

目的观察糖尿病机体主要的晚期糖基化终产物亚型-Nε羧甲基赖氨酸修饰白蛋白[Nε-(carboxymethyl)lysine albumin,CMLs]对脂肪干细胞(adipose tissue-derived stem cells,ADSCs)功能及血管新生作用的影响及丹红注射液(Danhong Injection,DH)的保护作用。方法采用酶消法从人皮下脂肪组织中分离培养人ADSCs,并通过光学显微镜进行形态学观察、分化能力评估。进一步采用WST-1增殖试剂盒、Transwell小室、流式AnnexinⅤ-FITC/PI凋亡检测试剂盒以及人VEGF的ELISA试剂盒分别观察对照组、BSA组(60μg/mL)、CML-BSA组(60μg/mL)、DH组(100μL/mL)、联合用药组(60μg/mL CML-BSA加100μL/mL DH),共5组干预液对ADSCs增殖、迁移、凋亡和分泌功能的影响。并通过体外血管新生实验观察其对ADSCs血管新生能力变化情况的影响。结果与BSA组比较,CML-BSA组能显著抑制ADSCs增殖和迁移的能力,增加凋亡,减少VEGF的分泌,减弱其血管新生能力(P<0.05);与对照组比比较,100μl/mL DH能显著促进ADSCs增殖和迁移的能力,抑制其凋亡,增加VEGF的分泌,改善其血管新生能力(P<0.05);与CML-BSA组比较,联合治疗组能显著逆转CML-BSA对ADSCs增殖和迁移能力的抑制作用,改善CML-BSA对ADSCs凋亡的促进作用,增加VEGF的分泌,提高其血管新生能力(P<0.05)。结论 CMLs能抑制ADSCs的增殖和迁移能力,促进其凋亡,抑制其血管新生能力。DH能改善CMLs的作用。