类球红细菌LHⅡβ-亚基/α-亚基融合蛋白吸收光谱分析

摘要

类球红细菌(Rb.sphaeroides)捕光色素蛋白复合体Ⅱ(LHⅡ)由9对β-亚基和α-亚基组成,分别是pucB和pucA基因编码的.为探究β-亚基和α-亚基融合后是否能够形成正常结构与功能的LHⅡ,在pucB和pucA基因之间加入一段柔性序列(Flexible sequence,FS),构建pucB-FS-pucA融合表达载体,导入双缺失突变体Rb.sphaeroides CQU68菌株中,经IPTG诱导,近红外700-900 nm吸收光谱扫描细菌活体,亲和层析分离纯化蛋白并进行SDS-PAGE电泳鉴定.与对照(未融合的菌株)相比,融合菌株在800 nm和850 nm附近也出现了两个典型的特征吸收峰,但吸收峰值略微降低并蓝移,电泳结果说明融合蛋白在类球红细菌中获得成功表达.可见,两亚基融合后能够形成有活性的LHⅡ并进入到光合膜系统.