经睾丸输出小管注射慢病毒对Wistar大鼠生殖系统的影响

摘要

目的探讨慢病毒高毒性物质稳定转基因技术对雄性Wistar大鼠生殖系统的影响。方法构建PAX2稳定干扰的含有绿色荧光蛋白的慢病毒,将该病毒溶液用台盼蓝标记,通过34 G针头注入16只Wistar大鼠睾丸输出小管。2周后用超声监测睾丸实质,1个月后将大鼠处死,取出睾丸及其附属腺体,免疫荧光染色及HE染色观察组织结构形态。结果大鼠睾丸输出小管注射,共有8只注射成功,均出现不同程度的睾丸曲精小管凋亡坏死,部分小管腔内可见报告基因的高表达,附睾上皮未出现明显的转染情况,而精囊腺上皮细胞出现不同程度的绿色荧光蛋白高表达。结论睾丸和附睾不适合雄性动物的慢病毒转染,并且该处转染容易影响精子的成熟和发育,而精囊腺注射慢病毒建立转基因动物模型具有可行性。