温郁金二萜类化合物C通过miR-223-3p/NF-kB通路对幽门螺杆菌诱导的GES-1细胞的保护作用

摘要

目的探索温郁金二萜类化合物C对幽门螺杆菌(Hp)诱导的GES-1细胞的保护作用及机制。方法选取GES-1细胞(空白组),采用Hp感染(模型组),使用不同浓度温郁金二萜类化合物C(10μg/ml、20μg/ml及80μg/ml)处理细胞(低剂量组、中剂量组及高剂量组)。CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭、迁移,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏素(N-cadherin)、波形纤维蛋白(Vimentin)基因mRNA及miR-223-3p水平,Western blot检测细胞E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、p-p65、p65及核因子κB抑制蛋白α(IKBα)蛋白水平。结果与空白组比较,模型组24 h、48 h及72 h细胞A值升高,凋亡率降低,侵袭、迁移细胞数升高(P<0.05);与模型组比较,温郁金二萜类化合物C处理组24 h、48 h及72 h细胞A值降低,凋亡率升高,侵袭、迁移细胞数降低,且呈现浓度依赖性(P<0.05)。Hp诱导GES-1细胞发生上皮间质转化(EMT),温郁金二萜类化合物C可逆转EMT,且呈现浓度依赖性。与空白组比较,模型组细胞miR-223-3p、p-p65、p65及IKBα蛋白表达水平升高(P<0.05),与模型组比较,温郁金二萜类化合物C处理组细胞miR-223-3p、p-p65、p65及IKBα蛋白表达水平下降,且呈现浓度依赖性(P<0.05)。结论温郁金二萜类化合物C可通过miR-223-3p/NF-κB通路抑制Hp感染GES-1细胞的恶性生物学行为。