丫蕊花甾体皂苷YB16诱导人结肠癌细胞凋亡作用

摘要

目的探讨丫蕊花甾体皂苷(YB16)对人结肠癌细胞HCT15凋亡的作用及其机制。方法体外培养HCT15细胞,以不同浓度的YB16(0.125~16.000μmol/L)干预24 h,噻唑蓝(MTT)法检测HCT15细胞存活率,光镜下观察细胞形态变化,吖啶橙(AO)染色观察细胞凋亡情况,JC-1染色观察细胞膜电位改变,蛋白免疫印迹检测细胞内B淋巴细胞瘤–2(Bcl-2)、多聚ADP–核糖聚合酶(PARP)、激活型PARP(cleaved-PARP)、半胱氨酸蛋白酶–3(caspase-3)、激活型caspase-3(cleaved-caspase-3)蛋白表达。结果与对照组比较,各剂量YB16组细胞存活率明显下降,呈剂量效应关系(P <0.05);与对照组比较,YB16组细胞出现凋亡特征性改变,凋亡细胞明显增多;与对照组比较,0.500、1.000μmol/L YB16组HCT15细胞内Bcl-2蛋白表达[分别为(0.542±0.04)、(0.351±0.03)]明显下降,cleaved-PARP、cleaved-caspase-3蛋白表达[分别为(0.647±0.05)、(0.686±0.03)和(0.677±0.03)、(0.762±0.04)]均显著上升,差异有统计学意义(均P <0.05)。结论 YB16可抑制HCT15细胞增殖、促进细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2蛋白表达、上调cleaved-PARP、cleaved-caspase-3蛋白表达有关。