镉暴露对HepG2细胞NRF2信号通路影响

摘要

目的探讨镉暴露对HepG2细胞转录因子NF-E2相关因子2(NRF2)信号通路的影响。方法采用甲臢比色法测定CdCl_2(0、1、2.5、5、10、25、50、100、200μmol/L)处理24 h后,HepG2细胞活力变化;应用蛋白免疫印迹法检测CdCl_2(1、2、5、10、20μmol/L)处理细胞6 h后,NRF2蛋白水平;采用RT-q PCR方法检测10μmol/L CdCl_2处理细胞2、4、6、12、24 h后,GCLC、GCLM、HO1和AKR1C1 m RNA水平变化,检测CdCl_2(1、2、5、10、20μmol/L)处理细胞6 h后,GCLC、GCLM、HO1和AKR1C1 m RNA水平变化。结果 HepG2细胞活力随镉处理剂量升高而降低(P<0.05);与对照组(0.60±0.01)比较,1、2、5、10、20μmol/L镉处理组HepG2细胞NRF2蛋白表达水平[分别为(0.65±0.01)、(1.37±0.04)、(1.94±0.05)、(2.24±0.07)、(2.22±0.05)]均明显升高(P<0.05);与对照组比较,镉处理6 h时,HepG2细胞内GCLC、GCLM、HO1和AKR1C1 m RNA水平[分别为(45.76±7.04)、(114.21±5.23)、(59.52±1.50)、(674.13±27.12)]明显升高(P<0.05);与对照组比较,5μmol/L镉处理组HepG2细胞内GCLC和GCLM m RNA水平[分别为(24.77±2.16)、(29.93±0.67)]升高,2μmol/L镉处理组HepG2细胞内HO1和AKR1C1 m RNA水平[分别(28.55±2.02)、(186.32±12.63)]升高(P<0.05)。结论镉暴露能激活HepG2细胞系中NRF2信号通路。