巨尾阿丽蝇卵不同发育时间形态变化及基因表达

摘要

目的探讨巨尾阿丽蝇（Aldrichina grahami）卵不同发育时间的形态变化与基因表达差异规律。方法从巨尾阿丽蝇成虫产完卵开始记为0 h,每隔4 h取1次卵,直至幼虫孵出,用扫描电镜观察不同发育时期形态学变化特点;提取0、4、8、12、16 h的蝇卵RNA,应用Real-time PCR比较循环阈值（CT值）法测定bicoid、slalom、几丁质合成酶（chitin synthase）基因相对表达量,用SPSS 19.0软件对CT值及时间进行曲线拟合。结果扫描电镜结果显示,发育0～4 h时,巨尾阿丽蝇卵变化不明显,卵孔周围有突起,8 h卵孔周围变光滑,卵孔可见,12 h卵孔消失,周围皱缩,16 h卵孔周围皱缩明显,18 h发育为幼虫;RT-PCR结果显示,bicoid基因在发育0～8 h表达变化不明显、12h表达水平最高,CT值为（4.19±0.04）;slalom基因4 h表达水平最低、12 h表达最高,CT值分别为（4.05±0.01）、（6.20±0.03）;chitin synthase基因8 h表达量最高、12 h最低,CT值分别为（5.80±0.01）、（4.38±0.02）;不同发育阶段各基因CT值不同,差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论巨尾阿丽蝇卵形态结构随发育时间而发生变化,不同发育时期bicoid、slalom、chitin synthase基因表达量存在差异。