HIF-1α和TGF-β1在人胚肺成纤维细胞内的表达及IL-4、INF-γ对其表达的影响

摘要

目的观察人胚肺成纤维细胞(MRC-5)在LPS刺激前后HIF-1α、TGF-β1的表达情况及对增殖、凋亡、迁移的影响,并通过IL4、INF-γ的干预,分析MRC-5中HIF-1α和TGF-β1的表达变化,从而为COPD患者气道重塑的机制提供理论支持。方法采用100μg·L^-1 LPS干预MRC-5,用CCK8、流式细胞仪和Transwell分别检测MRC-5增殖、凋亡及迁移情况,并使用RT-PCR、Western blot法检测细胞内HIF-1α,TGF-β1的表达情况;同时加入不同浓度IL-4,INF-γ刺激MRC-5,检测不同时间点细胞内HIF-1α和TGF-β1蛋白表达变化。结果与MRC-5组相比,LPS+MRC-5组的细胞增殖能力明显增强(P<0.05),处于S期的细胞百分数显著增多(P<0.05),细胞凋亡率明显减少(P<0.05),细胞迁移能力明显提高(P<0.05),同时HIF-1α和TGF-β1的mRNA及蛋白水平均显著升高(P<0.05)。而INF-γ对MRC-5细胞刺激时间的增加,HIF-1α和TGF-β1表达量同时显著降低;随着INF-γ刺激浓度的增加,HIF-1α和TGF-β1MRC-5中表达量同时显著降低;随着IL-4刺激时间的增加,HIF-1α和TGF-β1在MRC-5表达量显著增高;随着IL-4刺激浓度的增加,HIF-1α和TGF-β1在MRC-5中表达量显著增高。结论在炎症环境下(LPS处理)MRC-5的增殖明显,细胞迁移能力有所提高,细胞凋亡减少,同时,IL-4可明显提高MRC-5中HIF-1α和TGF-β1的表达,INF-γ可降低HIF-1α和TGF-β1的表达,表明IL-4、INF-γ可能通过HIF-1α、TGF-β1影响COPD患者的气道重塑。