pH/氧化还原双重响应胶束复合物制备与表征

摘要

目的制备pH和氧化还原双重刺激响应型胶束复合物,并对其触发释放行为以及体外基因沉默效率进行评价。方法采用电位滴定法测定聚合物的pKa值,兔红细胞溶血性实验考察聚合物的溶血性。通过薄膜分散法制备胶束复合物,超滤离心法测定包封率。分别通过评价不同pH下聚合物的临界胶束浓度、粒径与粒径分布以及siRNA释放量的测定,考察胶束复合物的触发释放行为。采用MTT噻唑蓝法考察细胞存活率,化学发光法考察体外基因沉默效率。结果合成的聚合物pKa值约为6.8,在pH 4.0~7.4之间具有良好的缓冲能力,具有较低的溶血性和细胞毒性。制备的胶束复合物包封率均在89%以上。N/P为6的胶束复合物相较于N/P 10和15的胶束复合物,具有显著更好的触发释放作用(50.62%vs 7.72%和25.66%,P<0.05)和基因沉默效率(80.53%vs 59.06%和62.51%,P<0.05)。结论构建的低N/P胶束复合物具有良好的缓冲能力和较低毒性,可在肿瘤细胞内有效实现siRNA的触发释放,达到较高的基因沉默效率。