红花中羟基红花黄色素A的提取及对肝癌细胞的抑制作用

摘要

目的探讨闪式提取技术提取红花中羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)及其对肝癌细胞生长、侵袭和迁移能力的影响和机制。方法以提取含量为指标,考察提取时间、提取电压、最佳料液比对提取的影响,并通过正交试验优选最佳提取工艺。将不同质量浓度的HSYA分别作用于肝癌SMMC-7721和Hep G2细胞,在作用24、48、72 h后,采用MTT法、Transwell法和流式细胞术分别检测细胞的增殖能力、迁移能力、侵袭能力和细胞周期与凋亡情况。用免疫印迹法(Western blot)分析细胞中VEGF、PI3K、AKT及Snail蛋白的表达结果。结果闪式提取HSYA最佳工艺为料液比40∶1 g·mL-1,3 min和80 V电压。HSYA可以抑制肝癌SMMC-7721和Hep G2细胞的增殖,且有剂量和时间相关性(P <0. 05),并可以显著抑制其侵袭和迁移(P <0. 05),促进细胞凋亡,且随着HSYA浓度的增加,细胞的侵袭和迁移能力逐渐降低,细胞凋亡率逐渐增加,细胞G0/G1期比例显著增加(P均<0. 05),S期细胞比例显著降低(P均<0. 05)。HSYA使VEGF、PI3K、AKT及Snail蛋白表达下降(P均<0. 05)。结论闪式提取HSYA工艺简单,提取率高,可以用于红花中HSYA的提取。同时HSYA能抑制肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移,阻滞细胞周期停留在G0/G1期,诱导肝癌细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/AKT/Snail信号通路的激活有关,为HSYA治疗肝癌的临床应用提供理论依据。