高糖对缺氧/复氧乳鼠心肌细胞GLP-1受体表达影响及机制研究

摘要

目的探索高糖对缺氧/复氧(H/R)乳鼠心肌细胞胰高血糖样肽-1受体(GLP-1R)表达的影响及其分子机制。方法培养乳鼠心肌细胞建立高糖H/R损伤模型,随机将心肌细胞分为对照(正常血糖)组、正常血糖+H/R组、正常血糖+GLP-1激动剂(Exentin-4)处理组、高糖组、高糖+H/R组、高糖+H/R+Exentin-4处理组。Western blot观察高糖H/R后GLP-1R表达变化情况。RT-PCR和Western blot观察各组细胞H/R损伤的氧化应激标志物NOX4、p22phox表达变化;Western blot检测高糖条件下蛋白激酶C(PKC)表达,并观察PKC激动剂PMA和或PKC抑制剂Go 6983处理后GLP-1R表达及NOX4、p22phox表达变化。结果正常血糖条件下,H/R后心肌细胞氧化应激加重(P<0.05),Exendin-4降低氧化应激损伤(P<0.05);与正常血糖H/R组相比,高糖H/R组氧化应激损伤加重(P<0.05),而Exendin-4对高糖条件下抗氧化应激作用无明显改善。与正常血糖组相比,高糖组PKC表达升高(P<0.05),参与心肌细胞GLP-1R表达下降,抑制PKC活性可部分恢复Exendin-4高糖条件下抗氧化应激作用(P<0.05)。结论高糖条件下GLP-1R表达下降,PKC参与其表达下降,抑制PKC活性可部分恢复Exendin-4高糖条件下抗氧化应激作用。