京尼平交联大鼠肾去细胞生物支架提高支架生物学性能的实验研究

摘要

目的通过京尼平交联大鼠肾去细胞生物支架,提高支架的生物学性能。方法取250 g左右的健康SD大鼠80只,分为正常组、未交联支架组、戊二醛交联支架组和京尼平交联支架组。游离大鼠肾、肾动脉,连接蠕动泵,经PBS灌注去血后得到的肾作为正常组。其余大鼠肾依次灌入肝素化PBS溶液、1%TritonX-100、1%十二烷基硫酸钠(SDS)、去离子水,完成大鼠肾去细胞生物支架制备。戊二醛交联支架组继续灌入0.625%戊二醛(GA)1500 mL;京尼平交联支架组浸入0.5%的京尼平溶液于37℃恒温箱中行化学交联24 h;未经戊二醛或京尼平交联的肾去细胞支架作为未交联支架组。对4组肾分别作HE、Masson、免疫荧光染色及电子显微镜扫描,观察支架组织形态学及超微结构改变;力学拉伸试验检测机械力学性能。结果 SD大鼠肾支架经京尼平交联后,HE、Masson染色显示胶原纤维排列更加紧密有序,肾小球处的纤维呈聚集状,Collagen Ⅰ和Collagen Ⅳ荧光染色增强,电镜扫描可见交联后的去细胞支架内蜂窝状孔洞结构更加立体,并可见典型的肾小球龛样结构轮廓更加清晰;交联组肾弹性模量较支架组明显增强。结论京尼平交联大鼠肾支架能提高支架的生物学性能有助于为后期细胞植入和器官再生。