低强度脉冲超声对人牙周膜细胞Hippo信号通路的影响

摘要

目的:观察低强度脉冲超声(low intensity pulsed ultrasound,LIPUS)对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)Hippo信号通路相关基因表达的影响。方法:原代培养hPDLCs,对第3代hPDLCs进行30 mW/cm^(2)、45 mW/cm^(2)、60 mW/cm^(2)3个辐照强度的LIPUS刺激25 min,连续刺激3 d。Western blot及定量聚合酶链反应(Q-PCR)法检测Hippo信号通路成骨相关基因的表达,观察细胞形态变化,筛选最佳的刺激条件。对刺激21 d的细胞进行茜素红染色,与对照组相比分析LIPUS对成骨的影响。结果:本研究通过鉴定成功培养出原代hPDLCs,LIPUS刺激hPDLCs后Hippo信号通路YAP、TAZ及RUNX2基因与蛋白表达增强,磷酸化的TAZ(p-TAZ)及YAP(p-YAP)蛋白表达下调,并且45 mW/cm^(2)与60 mW/cm^(2)成骨效果较30 mW/cm^(2)更加明显。hPDLCs经LIPUS(60 mW/cm^(2))刺激21 d后,钙结节明显较对照组增多。结论:适宜强度的低脉冲超声能够促进hPDLCs Hippo信号通路成骨相关基因的表达,这为优化牙齿正畸环境提供一定的理论基础。