应用mRNA差异显示技术寻找调控白腰纹鸟前脑发声控制神经核RA性双态性发育的基因(英文)

摘要

鸣禽的发声行为及其前脑发声控制核团存在显著的性双态性 ,这种性双态性是在发育过程中逐步建立起来的。鸣禽白腰纹鸟 35日龄 (P35 )前 ,雌、雄鸟前脑发声控制神经核RA (Robustnucleusofarcopallium)不存在性别差异 ;到 4 5日龄 (P4 5 )时 ,雌、雄鸟RA体积已经出现了显著的差异。推测这种神经结构的性双态性的形成与各种基因的不同时空表达有关。本实验以发育不同阶段 (P35时的雌性 ,P4 5时的雌性和雄性 )的雌、雄白腰纹鸟RA核团为研究对象 ,用mRNA差异显示银染技术来寻找前脑上述三组材料间的差异表达基因 ,试图发现调控RA核团性双态性发育的关键基因。本实验共选用了 4种锚定引物与 16种随机引物所组成的 6 4组引物进行DDRT PCR (mRNAdifferentialdisplayandreversetranscription polymerasechainreaction)反应。第一次扩增后 ,在测序胶上显示出 115 8条cDNA扩增产物 ,其中 2 73个为差异表达。长度分布于 10 0 - 5 0 0bp之间的差异条带共 16 1条。本实验重点研究了P35雌性和P4 5雄性共表达或P4 5雌性单独表达的条带 (共 19条 ) ,推测这些基因片段可能与引起RA核团中的细胞凋亡和性双态性的形成有关。二次PCR扩增后 ,进一步筛选出 16个差异条带 ,其中 11个为P35雌性和P4 5雄性共同表达的 ,5个是P4 5雌?