羟基红花黄色素A对人肾小管上皮细胞冷缺氧/复氧凋亡的影响

摘要

目的探讨羟基红花黄色素A（hydroxysafflor yellow A, HSYA）预处理组对人肾小管上皮细胞（HK2细胞）冷缺氧/复氧（冷H/R）损伤导致的细胞凋亡的影响。方法 HK2细胞株消化传代后采用计算机随机方法分为sham组（对照组）、冷缺氧/复氧组（冷H/R组, 细胞冷缺氧4 h, 复氧4 h）、HSYA预处理组（HSYA各亚组, 缺氧前0.5 h给予不同剂量的HSYA, 余同冷H/R组）。采用CCK-8法测细胞存活率;采用细胞爬片免疫组化法和免疫印迹法检测各组HK-2细胞的Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达情况。结果 （1）与冷H/R组相比, HSYA不同剂量可不同程度提高细胞存活率, 但仅HSYA25 μmol/L组效果最显著（74.000±5.500与59.000±3.800,P＆0.05）。（2）免疫细胞化学半定量评分:与冷H/R组相比, HSYA25 μmol/L组HK2细胞中Bax、Caspase-3的表达明显降低[0（0, 1）与8（6, 8）, Z=2.041, P＆0.05和3.400±0.548与7.800±1.095, t=11.000, P＆0.01];Bcl-2蛋白的表达明显升高（6.800±1.095与1.400±0.548, t=10.590、P＆0.01）;Bcl-2/Bax比值明显升高。（3）免疫印迹法检测蛋白:与冷H/R组相比, HSYA25 μmol/L组HK2细胞中Bax、Cleaved-Caspase-3和Pro-Caspase-3蛋白水平明显减少（0.707± 0.012与0.968±0.117, 0.480±0.009与0.735±0.005, 0.992±0.008与1.197±0.005, P均＆0.01）;Bcl-2蛋白表达水平显著增加, Bcl-2/Bax比值明显增高（0.410±0.009与0.273±0.008, 0.582±0.016与0.282±0.080, P均＆0.01）。实验结果与免疫细胞化学结果相一致。结论 HSYA可有效减少冷缺氧/复氧后HK2细胞的损伤。