番鸭细小病毒弱毒株VP_2基因的分子克隆与序列测定

摘要

将番鸭细小病毒 (MDPV)强毒Q株经番鸭胚连续传代 ,获得致弱株MDPV 2 6。根据已发表的MDPV的全基因序列 ,设计了 1对引物LHMP7/LHMP8,同时在这 2条引物中分别加入 2种限制性核酸内切酶SacⅡ和KpnⅠ的酶切位点。应用PCR技术扩增了MDPV 2 6株的VP2 基因片段。将扩增后的基因片段重组到 pMD18 T质粒载体上 ,并对插入片段进行序列测定。测序结果表明 ,弱毒株MDPV 2 6与强毒株MDPV Q的VP2 基因序列相同率达 99.7% ,与国外分离株的同源性为 98.3 % ,说明强、弱毒株的VP2