枳术丸汤剂含药血清对大鼠结肠Cajal间质细胞增殖及PI3K/Akt信号通路的影响

摘要

目的 探讨枳术丸汤剂含药血清对大鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)增殖以及对PI3K/Akt信号通路的影响。方法 20只大鼠随机分为枳术丸汤剂组、空白血清组,每组各10只,枳术丸汤剂组灌胃枳术丸汤剂5.8 g/kg,空白血清组灌胃等量蒸馏水,每天1次,连续7 d,取血制备血清;分别设立不同浓度血清、不同干预时间、不同浓度PI3K/Akt抑制剂LY294002作用于大鼠结肠ICC细胞,计算增殖率并筛选出最佳干预措施;将不同因素处理的大鼠结肠ICC细胞分为正常组(培养液)、模型组(正常细胞+LY294002)、空白血清组(模型组+10%空白血清)、枳术丸汤剂组(模型组+5%枳术丸汤剂含药血清),分别加入空白血清和含药血清干预;免疫荧光检测、Western blot、RT-qPCR分析药物对PI3K、Akt蛋白及基因表达的影响。结果 25μmol/L PI3K/Akt抑制剂LY294002、5%枳术丸汤剂含药血清及10%空白血清干预大鼠结肠ICC细胞24 h为最佳干预措施;免疫荧光、Western blot、RT-qPCR检测均显示,与正常组比较,模型组ICC细胞PI3K、Akt表达降低(P<0.01);与模型组和空白血清组比较,枳术丸汤剂组ICC细胞PI3K、Akt表达均升高(P<0.05,P<0.01)。结论 枳术丸含药血清在一定浓度下能促进ICC细胞的增殖,其机制可能与调控PI3K/Akt信号通路相关。