鳖甲煎丸含药血清抑制肝癌细胞的miRNA-mRNA调控机制分析

摘要

目的 探讨鳖甲煎丸干预肝癌细胞后miRNA/mRNA的表达变化和分子机制.方法 CCK-8法检测鳖甲煎丸含药血清干预肝癌细胞后的增殖活性变化,流式细胞术检测鳖甲煎丸含药血清对肝癌细胞细胞周期和凋亡率的影响,全细胞转录组学分析miRNA/mRNA表达变化,差异表达的miRNA和mRNA进行KEGG富集分析,构建miRNA-mRNA调控网络,通过荧光定量PCR和Western blot法验证PNMT和ST8SIA5表达.结果 鳖甲煎丸含药血清可抑制肝癌细胞增殖活性,阻滞细胞生长于G0/G1期,还可促进细胞凋亡.全细胞转录组学分析找到差异表达的48个miRNA和168个mRNA.通过KEGG富集分析发现代谢通路是主要通路,PNMT和ST8SIA5是其调控的核心基因.鳖甲煎丸含药血清可抑制PNMT的表达和上调ST8SIA5的表达.结论 miRNA-mRNA调控网络是鳖甲煎丸抑制肝癌细胞增殖的分子机制,其中代谢通路是主要调控通路,PNMT和ST8SIA5是调控的核心基因.