川芎嗪调控miR-31-5p/Ednrb通路抑制人肺泡上皮细胞BEAS-2B凋亡和炎症反应

摘要

目的 探讨川芎嗪(TMP)调控miR-31-5p/内皮素受体B(Ednrb)通路对人肺泡上皮细胞BEAS-2B凋亡和炎症反应的影响.方法 采用1 μg/mL脂多糖(LPS)处理BEAS-2B细胞构建炎症模型.将BEAS-2B细胞分为对照组、LPS 组、LPS+川弯嗪5 μmol/L 组、LPS+川弯嗪20 μmol/L 组、LPS+川芎嗪80 μmol/L 组、LPS+miR-con 组、LPS+miR-31-5p 组、LPS+si-con 组、LPS+si-Ednrb 组、LPS+川芎嗪+pcDNA 组、LPS+川芎嗪+pcDNA-Ednrb 组.酶连免疫吸附实验(ELISA)试剂盒检测细胞培养液中白介素IL-1β、IL-6和TNF-a(肿瘤坏死因子)的含量;RT-qPCR和Western blot检测miR-31-5p(炎性相关微小RNA)和Ednrb(内皮素受体B)表达.双荧光素酶报告实验和Western blot验证miR-31-5p对Ednrb的靶向调控关系.结果 与对照组比较,LPS组BEAS-2B细胞Ednrb蛋白、凋亡率以及IL-1p、IL-6和TNF-α的水平增加,miR-31-5p 表达降低(P＜0.01);与LPS 组比较,LPS+川芎嗪5 μmol/L 组、LPS+川弯嗪20 μmol/L组、LPS+川芎嗪80 μmol/L组BEAS-2B细胞Ednrb蛋白表达、凋亡率以及IL-1β、IL-6和TNF-α的水平降低,miR-31-5p表达升高(P＜0.05,P＜0.01).miR-31-5p靶向负性调控Ednrb表达.与LPS+miR-con组比较,LPS+miR-31-5p 组BEAS-2B 细胞凋亡率以及IL-1β、IL-6和TNF-α的水平降低(P＜0.01);与LPS+si-con 组比较、LPS+si-Ednrb组BEAS-2B细胞凋亡率以及培养液中IL-1β、IL-6和TNF-α的水平降低(P＜0.01);与LPS+川芎嗪+pcDNA组比较,LPS+川芎嗪+pcDNA-Ednrb组BEAS-2B细胞凋亡率、培养液中IL-1β、IL-6和TNF-α的浓度升高(P＜0.05).结论 川芎嗪通过上调miR-31-5p/Ednrb通路抑制人肺泡上皮细胞BEAS-2B凋亡和炎症反应.