金藤清痹颗粒通过调节免疫微环境对类风湿关节炎大鼠的干预作用

摘要

目的研究金藤清痹颗粒通过调节免疫微环境对类风湿关节炎大鼠的干预作用及其机制。方法通过注射牛Ⅱ型胶原和弗氏不完全佐剂建立胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠模型,造模成功后随机分为模型组、甲氨蝶呤组、雷公藤多苷组及金藤清痹颗粒低、中、高剂量组,每组10只,另以10只正常大鼠作为正常组,给药组灌胃给予相应剂量药物,模型组和正常组灌胃给予等体积0.9%氯化钠注射液。每7 d进行1次足底厚度检测和关节指数评分,HE染色观察膝关节滑膜病理改变,免疫组化检测滑膜CD68、CD86、CD206表达,流式细胞术检测外周血中辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)比例,Western blot法检测TLR4/NF-κB信号通路蛋白表达,RT-qPCR法检测TLR4、IKKβmRNA表达。结果金藤清痹颗粒与甲氨蝶呤、雷公藤多苷均能减轻CIA大鼠四肢关节肿胀(P<0.05),降低M1/M2型巨噬细胞比例、Th17/Treg细胞比例、TLR 4 mRNA及TLR4、p-IκBα、细胞核p65蛋白表达(P<0.05,P<0.01),升高IKKβ、胞质p65蛋白及IKKβmRNA表达(P<0.05,P<0.01),并呈剂量依赖性。结论金藤清痹颗粒能够通过影响M1/M2型巨噬细胞极化,调节Th17/Treg细胞平衡,调控TLR4/NF-κB信号通路表达,改善免疫微环境,从而缓解类风湿关节炎大鼠关节肿胀症状。