赤芍801对小鼠巨噬细胞COX-1和COX-2活性、mRNA及蛋白表达的影响

摘要

目的 研究赤芍801(propyl gallate,PrG)对环氧酶(cyclooxygenase,COX)活性、mRNA及蛋白表达的影响.方法 采用基于小鼠腹腔巨噬细胞的COX-1和COX-2体外筛选模型,用钙离子导入剂(calcium ionophore A23187)短时刺激小鼠腹腔巨噬细胞,测定培养上清液中的6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的量反映COX-1活性;用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)长时间刺激细胞,测定培养上清液中的前列腺素E2(PGE2)的量反映COX-2活性.半定量RT-PCR法检测PrG对LPS刺激的Raw小鼠巨噬细胞COX-1、COX-2 mRNA表达的影响.Western blot法检测PrG对LPS刺激的Raw小鼠巨噬细胞COX-1、COX-2蛋白表达的影响.结果 PrG体外10,5μmol·L-1浓度下不影响6-keto-PGF1α生成(P＞0.05),而在1,0.5,0.1,0.05μmol·L-1浓度下则诱导6-keto-PGF1α生成(P＜0.01),并呈较好的剂量依赖性.PrG体外1,10 μmol·L-1可抑制PGE2生成(P＜0.05).PrG不同浓度对LPS刺激的Raw小鼠巨噬细胞COX-1、COX-2 mRNA表达无明显影响.PrG(100,10,1 μmol·L-1)浓度下可抑制COX-2蛋白表达,但对COX-1蛋白表达无影响.结论 在0.05～10 μmol·L-1浓度范围内,PrG低浓度时促进6-keto-PGF1α生成,高浓度时抑制PGE2生成,提示其高浓度时抑制COX-2,低浓度时激活COX-1;不同浓度PrG对COX-1COX-2 mRNA表达均元明显影响.PrG(1～100 μmol·L-1)浓度下可抑制COX-2蛋白表达,但对COX-1蛋白表达无影响.