AICAR对不同肿瘤细胞系c-Myc表达及细胞增殖影响的差异研究

摘要

目的探讨5-氨基咪唑-4-羧基酰胺核糖核苷(5-aminoimidazole-4-carboxamide 1-β-D-ribofuranoside,AICAR)在不同肿瘤细胞系内对促癌基因c-Myc的调节作用及对细胞增殖能力的影响。方法使用qRT-PCR法检测AICAR处理后c-Myc mRNA表达水平的变化。Western blot检测AICAR处理后c-Myc蛋白水平的变化。使用RNA干扰分析AICAR对c-Myc的调节作用是否依赖于AMPK和AICAR相关代谢酶。利用放线菌素D和放线菌酮研究AICAR对c-Myc的mRNA和蛋白质稳定性的影响。在多种肿瘤细胞中,用Western blot检测AICAR对不同肿瘤细胞c-Myc的调节作用,并用MTT法检测AICAR处理对细胞增殖的影响。结果AICAR明显提高c-Myc的mRNA和蛋白的表达。AICAR对c-Myc的上调效果在处理约12 h后达饱和。AICAR对c-Myc的调控不依赖于AMPK信号通路,也不是通过AICAR的代谢产物实现的。AICAR明显提高c-Myc mRNA的稳定性,但不影响蛋白的稳定性。AICAR对c-Myc的上调作用具有细胞特异性,在SW1990、786-O和A549细胞上调c-Myc表达,在HepG2、MCF-7和U2OS细胞下调c-Myc表达。在HepG2细胞中,AICAR处理明显降低细胞活力。而在SW1990和A549细胞中AICAR处理组的细胞活力与对照组差异无统计学意义。只有当c-Myc被敲低时,AICAR处理才会影响细胞活力。结论AICAR可以通过不依赖于AMPK的方式上调c-Myc的表达。AICAR对c-Myc表达调控的作用具有细胞选择性。AICAR对c-Myc的调控影响了其对肿瘤细胞增殖的抑制效果。