亲水相互作用超高效液相色谱法分析单抗N糖谱的方法学联合验证

摘要

目的对亲水相互作用超高效液相色谱法检测单抗N糖谱进行多家实验室的联合验证。方法依据ICH_Q2_R1指导原则和2015年版《中国药典》通则9101,开展方法学验证。评价指标包括:特异性、线性、准确性、精密性、定量限、范围和耐用性。结果验证数据表明,该方法具有良好的特异性、准确性、精密性和耐用性。在100~400μg蛋白范围内具有良好的线性,r^2大于0. 98,且回收率在86%~117%内。精密性评价结果显示,该方法整体的RSD值小于10%。该方法的定量限为0. 040%,可对在0. 040%~78. 751%内的单个色谱峰进行准确定量分析。同时多个条件下的耐用性评价结果表明,该方法具有耐用性,峰面积百分比的RSD小于5%,保留时间的RSD小于1%。结论组织开展的基于亲水相互作用超高效液相色谱法(HILIC-UPLC)的检测单抗N糖谱的方法学联合验证,为《中国药典》标准提高提供方法学验证依据。