法舒地尔对支气管哮喘小鼠肺组织Rho激酶-1表达及气道炎症的影响

摘要

目的观察Rho激酶-1抑制剂法舒地尔对支气管哮喘（简称哮喘）小鼠肺组织Rho激酶-1表达及气道炎症的影响,探讨Rho激酶-1在哮喘气道炎症中的作用机制。方法将24只BALB/c小鼠采用随机数字表法分为对照组、哮喘组和干预组,每组8只。哮喘组、干预组小鼠分别给予卵清白蛋白（OVA）致敏和激发。每次雾化前1h,干预组给予法舒地尔（10 mg/kg）腹腔注射。末次激发后收集BALF,离心后计数细胞总数及嗜酸粒细胞（EOS）数量。ELISA法测定BALF上清液中嗜酸粒细胞趋化因子（Eotaxin）、白细胞介素（IL）-5和IL-13水平。肺组织HE染色。采用逆转录PCR和免疫组织化学测定各组小鼠肺组织中Rho激酶-1 mRNA和蛋白的表达水平。结果 （1）哮喘组BALF中细胞总数及EOS数量分别为（1.45±0.12）×10~9/L和（0.52±0.06）×10~9/L,明显高于对照组[分别为（0.58±0.06）×10~9/L和（0.01±0.01）×10~9/L]（q值分别为25.909和35.002,均P＜0.01）和干预组[分别为（0.89±0.09）×10~9/L和（0.20±0.04）×10~9/L]（q值分别为16.676和21.537,均P＜0.01）。（2）哮喘组Eotaxin、IL-5及IL-13水平分别为（45±8）ng/L、（157±23）ng/L和（429±46）ng/L,明显高于对照组[分别为（10±3）ng/L、（26±6）ng/L和（126±20）ng/L]（q值分别为18.246、23.009、25.826,均P＜0.01）;干预组分别为（20±5）ng/L、（57±14）ng/L和（254±28）ng/L,明显低于哮喘组（q值分别为13.119、17.503、8.449,均P＜0.01）。（3）对照组小鼠气道周围无炎症细胞浸润,哮喘组小鼠气道黏膜水肿,气道壁及管周有大量以EOS为主的炎症细胞浸润,干预组气道炎症反应较哮喘组减轻。（4）哮喘组肺组织Rho激酶-1 mRNA.和蛋白的表达水平明显高于对照组（q值分别为25.614和8.156,均P＜0.01）,干预组Rho激酶-1 mRNA和蛋白表达水平低于哮喘组（q值分别为20.379和4.135,均P＜0.01）。（5）Rho激酶-1 mRNA表达量与BALF中EOS数量、Eotaxin、IL-5和IL-13水平呈正相关（r值分别为0.709、0.600、0.613、0.650,均P＜0.01）。结论 Rho激酶-1参与过敏原诱导的哮喘小鼠气道炎症的发生,应用法舒地尔抑制其表达和活性可能改善哮喘气道炎症。