二甲基三十六烷基铵-卡介苗多糖核酸在结核亚单位疫苗中的佐剂效应

摘要

目的探讨二甲基三十六烷基铵（DDA）、卡介苗多糖核酸（BCG-PSN）作为结核病融合蛋白疫苗佐剂的免疫效应。方法采用热酚法制备BCG-PSN,与DDA联合作为融合蛋白AMM(Ag85B-MPT64190-198-Mtb8.4)佐剂免疫小鼠,设卡介苗、生理盐水、弗氏不完全佐剂（IFA）及单独应用DDA或BCG-PSN一种佐剂的各组作为对照。应用ELISA和酶联免疫斑点法检测免疫小鼠的体液与细胞免疫反应。结果分离培养疫苗免疫小鼠的脾脏淋巴细胞,用特异性抗原Ag85B刺激后,AMM+DDA+BCG-PSN疫苗组、AMM+DDA组和卡介苗组小鼠每1×10~6个脾淋巴细胞分泌γ-于扰素的细胞数分别为222±79、259±85和230±64,均明显高于AMM+PBS组（40±4）、AMM+IFA组（10±3）、AMM+BCG-PSN组（132±18）和生理盐水组（8±4）,差异有统计学意义（t值为2.923～7.118,均P＜0.05）;与单用DDA组比较,添加DDA和BCG-PSN两种佐剂的疫苗组小鼠血清抗体滴度Ig2a/IgG1较高（0.125和0.025）,但γ-干扰素分泌水平没有增高。结论 AMM+DDA+BCG-PSN结核病亚单位疫苗能够引起较强的Th1细胞免疫为主的免疫反应,DDA+BCG-PSN（尤其是DDA）具有增强结核病亚单位疫苗Th1细胞免疫应答的佐剂效应。