橡胶树转HbCBF1基因矮化突变体T-DNA插入位点研究

摘要

利用经PCR、GUS染色和Southem杂交均证明已成功转入HbCBF1的、田间表型为矮化的橡胶树植株C1为材料,通过TAIL-PCR的方法获得T-DNA右侧侧翼序列1.6 kb,根据侧翼序列与载体的序列设计引物分析验证该序列真实可靠,并设计引物判断基因的T-DNA插入以杂合位点存在,与此同时,将该侧翼序列与已有的橡胶树基因组测序结果进行比对分析,发现该插入位点处并不存在基因,根据CBF1与CaMV35s启动子的研究推测,C1植株的矮化表型是由于CaMV35s启动子驱动抗逆基因导致,而非插入基因造成.