亚低温对脑损伤大鼠海马神经元自噬相关蛋白表达的影响

摘要

目的探讨亚低温治疗对大鼠创伤性脑损伤（TBI）后海马区微管相关蛋白1轻链3（LC3）和Beclin-1表达的影响。方法将60只成年健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、TBI常温组和亚低温治疗组（31~33℃）,每组20只。采用Marmarou法建立大鼠TBI模型,给予常温或亚低温干预4 h。各组大鼠于6,12,24及48 h断头取脑,免疫荧光双标法检测LC3与神经元特异性核蛋白（NeuN）、LC3与哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）的共定位表达,Western blot法检测海马区LC3、Beclin-1和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）的蛋白表达。结果（1）激光共聚焦扫描显微镜观测到LC3与NeuN（或p-mTOR）的共定位表达,红色荧光与绿色荧光大部分重合。（2）与假手术组比较,TBI常温组LC3、Beclin-1蛋白表达明显增加（P＜0.05）,两者6 h开始增加,24 h达高峰,48 h回落,但仍高于假手术组水平;而p-mTOR蛋白表达量明显减少（P＜0.05）,于6 h开始减少,12 h达最低,24 h及48 h回升,但仍低于假手术组水平。（3）与TBI常温组比较,亚低温治疗组各时相点LC3、Beclin-1表达显著下调（P＜0.05）,同时p-mTOR蛋白表达量上调（P＜0.05）。结论亚低温可通过p-mTOR信号通路抑制TBI后海马区神经元自噬,进而起到一定的脑保护作用。