敲减骨桥蛋白的膝关节滑膜细胞转录组和蛋白质组定量分析

摘要

背景:骨关节炎患者关节软骨和关节液中骨桥蛋白mRNA水平及蛋白表达均较正常人明显增高,但是骨桥蛋白在膝骨关节炎发展进程中的作用及其具体机制在既往文献中尚未阐明.目的:探讨膝骨关节炎患者膝关节滑膜细胞中骨桥蛋白水平及其与骨关节炎严重程度的关系,并通过转录组和蛋白质组测序,进一步阐述其影响骨关节炎进展的机制.方法:选取2019年诊治的42例原发性膝骨关节炎患者,根据胫股关节受累情况,分为单间室骨关节炎组和双间室骨关节炎组.获取滑膜标本及关节液标本,PCR法检测滑膜标本中骨桥蛋白基因在细胞中的表达丰度,ELISA法检测关节液标本中骨桥蛋白水平.应用酶消化法获取培养人膝骨关节炎滑膜成纤维样细胞,用骨桥蛋白siRNA干预24 h后,对样品进行转录组和蛋白质组检测.结果 与结论:①与单间室骨关节炎组相比,双间室骨关节炎组关节滑膜及关节液中骨桥蛋白均升高,差异有显著性意义(P<0.05);②体外培养人膝骨关节炎滑膜成纤维样细胞,通过siRNA敲减骨桥蛋白后,转录组与蛋白质组定量研究分别鉴定了14662个转录本和3608个蛋白,其中5种蛋白的转录组与蛋白质组分析结果显示同步下降,2种蛋白的转录组与蛋白质组分析结果显示同步上升;③结果 表明,骨桥蛋白对骨关节炎产生不利影响,其机制可能是通过促炎作用和胰岛素样生长因子结合蛋白3对软骨的负面作用.