淫羊藿苷促进骨膜细胞增殖及其机制

摘要

背景：骨膜细胞是成骨细胞及软骨细胞的前体细胞，虽然有研究表明骨形态发生蛋白7等可用于诱导骨膜细胞增殖，但价格较贵，不易推广。植物雌激素淫羊藿苷诱导骨膜细胞增殖给组织工程提供了新的方向。目的：观察淫羊藿苷对人骨膜细胞增殖的影响，分析其作用机制。方法：体外培养人骨膜细胞，传至第3代后，用103/孔的浓度种植于24孔板。首先进行细胞增殖实验：实验分为2组：实验组加入不同质量浓度淫羊藿苷(10-1，10-2，10-3 mg/L)及细胞培养液，对照组仅加入细胞培养液。随后探讨细胞增殖机制，实验分为2组：实验组加入雌激素受体拮抗剂ICI182780于不同质量浓度淫羊藿苷(10-1，10-2，10-3 mg/L)的细胞中，对照组仅加细胞培养液培养。两种实验均采用MTT法检测细胞在第1，2，3天的细胞增殖情况。采用蛋白质印迹法检测不同质量浓度的淫羊藿苷对骨膜细胞雌激受体α和雌激素β蛋白的影响。结果与结论：①细胞增殖：体外培养的人骨膜细胞增殖良好，干预1，2，3 d后，质量浓度10-1，10-2及10-3 mg/L的淫羊藿苷均能促进细胞增殖(P<0.05)；②细胞增殖机制分析：加入雌激素受体拮抗剂ICI182780后，质量浓度10-1，10-2，10-3 mg/L的淫羊藿苷对骨膜细胞均无明显的促进增殖作用(P>0.05)，但可上调骨膜细胞雌激素受体α，β蛋白的表达；③结果证实，质量浓度10-1，10-2，10-3 mg/L淫羊藿苷能促进骨膜细胞增殖，其机制可能通过上调雌激素受体α，β蛋白的表达发挥作用的。