成纤维细胞生长因子9影响成骨细胞核心结合因子α1基因表达的作用

摘要

目的:探讨成纤维细胞生长因子9(fibroblastgrowthfactor-9,FGF-9)对成骨细胞核心结合因子α1(Cbfa1)的调节作用及其与有丝分裂原激活蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinase,MAPK)信号传导通路的关系,从而为骨质疏松症等骨性疾病发病机制的研究奠定了理论基础。方法:在成功构建含小鼠Cbfa1基因调控序列的荧光素酶报告基因表达质粒的基础上,利用瞬时转染技术,同时应用RT-PCR方法检测FGF-9对Cbfa1基因启动子活性和mRNA表达的影响,以及MAPK信号传导通路在其中的作用。结果:MC3T3-E1细胞中,FGF-9(1×10-9～1×10-5mol/L)作用24h能够降低Cbfa1基因启动子活性(P<0.05)。加入PD98059(10μmol/L)后阻断了FGF-9所诱导的Cbfa1基因启动子活性的降低(P<0.01)。C2C12细胞中,1×10-5mol/L的FGF-9处理后亦可以降低小鼠Cbfa1基因启动子活性(P<0.05),且未见到PD98059的阻断作用(P<0.01)。另外,在MC3T3-E1细胞中,FGF-9(1×10-9mol/L)处理后Cbfa1基因mRNA水平于第4天开始下降,且持续至第6天。C2C12细胞中未见到FGF-9(1×10-7mol/L)对Cbfa1基因mRNA表达水平的刺激或抑制作用。结论:FGF-9部分通过MAPK信号传导通路抑制MC3T3-E1和C2C12细胞中小鼠Cbfa1基因启动子活性及mRNA的表达。