局灶性脑缺血再灌注信号转导与转录激活子1的表达与磷酸化

摘要

目的:观察局灶性脑缺血再灌注信号转导与转录激活子1蛋白表达及其丝氨酸残基磷酸化,探讨其在神经元凋亡中的作用。方法:实验于2003-04/2004-01在中南大学湘雅医院神经病学研究所和中心实验室完成。选择雄性SD大鼠52只,随机分为空白对照组4只,假手术组16只,脑缺血组32只,脑缺血组又分为再灌注15min,1,4,12,24,48h,5,7d8个时相点,每个时相点4只。采用线栓法制作短暂性局限脑缺血模型。造模后进行神经功能评分,0分:正常,未见任何神经功能缺损表现。1分:垂直提起时前爪不能伸直。2分:行走时身体向左倾,向左侧旋转。3分:行走时身体向左侧跌倒。4分:不能自发行走或有意识障碍。根据首次评分,没有神经功能缺损、评分4分、有呼吸困难、提前死亡及处死时发现有蛛网膜下腔出血的动物均弃去。此外对于手术中出血过多的动物也弃去。采用免疫组织化学技术依靠特异性抗体检测信号转导与转录激活子1蛋白表达及其丝氨酸残基磷酸化。结果:纳入动物52只,均进入结果分析。①信号转导与转录激活子1于再灌注1h检测到阳性表达,12h达到峰值,24h下降[分别为(16.90±2.95),(28.40±4.62),(18.68±2.72)个]。②信号转导与转录激活子1磷酸化于再灌注15min出现,4h达到峰值,持续至少5d[分别为(7.87±1.82),(28.43±5.94),(10.25±2.48)个]。结论:脑缺血再灌注信号转导与转录激活子1表达上调并在丝氨酸残基磷酸化,可能参与再灌注神经元凋亡。