急性肺损伤兔肺泡灌洗液及血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6浓度变化与小剂量高渗盐水的干预

摘要

目的:观察创伤性休克兔经小剂量高渗盐水治疗后肺部炎症反应及病理学损伤的变化情况,进一步研究高渗盐水对创伤应激状态下急性肺损伤的作用及其机制.方法:实验于2005-08/2006-04在华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科实验室完成.①实验分组:新西兰白兔30只随机分为3组:假手术组、生理盐水处理组、高渗盐水治疗组,每组10只.②实验方法:假手术组:局部麻醉下行插管术及肝素化,静脉输注平衡盐80 mL.生理盐水处理组:用骨钳致兔一侧股骨中下1/3粉碎性骨折,经股动脉放血至储血瓶内,使平均动脉压降至(40±5)mm Hg,45 min后输注生理盐水4 mL/kg,再回输储血及2倍于失血量的平衡盐液进行复苏.高渗盐水治疗组:除以75 g/L的氯化钠溶液代替生理盐水外,其余处理同生理盐水处理组.在休克前、休克末、复苏后2 h、4 h分别采集静脉血1 mL备用.复苏后4 h空气栓寒处死动物,进行支气管肺泡灌洗,收集支气管肺泡灌洗液.③评估指标:双抗体夹心ELISA法测定支气管肺泡灌洗液以及血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6的浓度;凝胶电泳迁移率改变分析法检测肺泡巨噬细胞核蛋白提取物中核因子κB的活性;显微镜观察肺组织的病理改变.结果:30只实验动物均进入结果分析.①血清细胞因子浓度的变化:与假手术组比较,生理盐水处理组肿瘤坏死因子α浓度在休克发生后迅速升高(P＜0.05),复苏后又进一步上升(P＜0.01),白细胞介素1β及白细胞介素6浓度在复苏后4 h才有明显增加(P＜0.01 ).高渗盐水治疗组与生理盐水处理组比较,复苏后2～4 h肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素6浓度均有不同程度下降(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.05).②支气管肺泡灌洗液细胞因子浓度的变化:生理盐水处理组肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素6浓度均显著高于假手术组(P均＜0.01).高渗盐水治疗组各细胞因子的浓度虽然也高于假手术组(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01),但与生理盐水处理组比较均有明显降低(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01).③肺泡巨噬细胞核因子κB的活性变化:生理盐水处理组核因子κB的活性远高于假手术组(P＜0.01),而高渗盐水治疗组核因子κB的活性虽然也高于假手术组(P＜0.01),但与生理盐水处理组比较有显著降低(P＜0.01).④肺组织病理学改变:高渗盐水治疗组肺水肿及炎性细胞浸润明显减轻;Ⅰ、Ⅱ型肺泡上皮细胞内仅有少量空泡,上皮基本完整,基底膜增厚不明显.结论:小剂量高渗盐水治疗可抑制创伤性休克时核因子κB的活化,减少促炎细胞因子的合成与分泌,减轻肺部的炎症反应,从而发挥对急性肺损伤的保护作用.