大鼠心脏移植急性排斥反应与心肌细胞凋亡的相关性

摘要

目的:观察并分析大鼠心脏移植急性排斥反应与心肌细胞凋亡及心脏组织Fas及FasL表达的相关性。方法:实验于2006-01/07在南方医科大学南方医院动物实验中心完成。选用SPF级健康雄性SD,Wistar大鼠各36只,制作Wistar至SD大鼠Ono心脏移植模型,将36只SD受体大鼠按随机数字表法分为4组,即术后1,3,5,7d组,每组9只。①用QRT-PCR法检测大鼠术后1,3,5,7天心脏组织Fas,FasLmRNA的表达量,其中Fas蛋白表达于心脏组织中,FasL蛋白表达在活化的T细胞上。②应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术检测心肌细胞的凋亡细胞,阳性细胞胞核呈现棕黄色。凋亡指数=凋亡细胞数/总细胞数×100%。③根据常规病理切片进行急性排斥反应分级,计0￣4级,0级:无排斥,心肌组织正常,心肌间质无炎细胞浸润;4级:弥漫性多类型细胞浸润,明显心肌间质水肿、出血和心肌坏死。结果:36只心脏移植模型大鼠全部进入结果分析,无脱失。①大鼠心脏移植术后随时间推移排斥反应逐渐加重,术后第7天排斥反应最重。②随急性排斥反应的加重,凋亡指数、FasL的表达均逐渐增高(0级:1.626±0.677,0.198±0.023;4级:11.404±1.274,0.408±0.051),发生4级排斥反应大鼠的心肌细胞凋亡指数、心脏组织FasLmRNA的表达量最高;而FasmRNA的表达量保持不变。③心脏移植术后受体大鼠发生急性排斥反应的程度与心肌细胞凋亡指数及心脏组织FasLmRNA的表达成正相关(r=0.863,0.880,P0.05)。结论:心脏移植术后受体大鼠发生急性排斥反应的程度与心肌细胞凋亡指数及心脏组织FasLmRNA的表达成正相关,与FasmRNA表达不相关,提示可能是FasL阳性浸润细胞-活化的T细胞诱导Fas阳性心肌细胞凋亡从而介导移植排斥反应。