黄芪和三七对下肢缺血患者骨髓间充质干细胞体外分化的影响(英文)

摘要

背景：目前临床观察已经证实中药黄芪、三七能够改善下肢缺血症状，假设这种治疗作用与其促进骨髓间充质干细胞向血管内皮细胞分化有关。目的：验证黄芪、三七是否能够有效促进骨髓间充质干细胞增殖并向血管内皮细胞分化。设计、时间及地点：骨髓间充质干细胞的体外分化实验，于2005—04／06在北京中医药大学附属东直门医院教育部重点实验室完成。材料：抽取北京中医药大学东商门医院收治的下肢血管缺血性病变患者23例骨髓血，密度梯度法分离骨髓单个核细胞，即骨髓间充质干细胞。相当于生药材2g／mL的黄芪注射液为成都地奥九泓制药厂产品，主要成分为三七总皂苷的血塞通粉针剂黑龙江珍宝岛制药有限公司产品，CD34抗体为美国BD公司产品，FACS Calibur流式细胞仪为美国BD公司产品。方法：将骨髓间充质干细胞与3mL低、中、高剂量含生药4，12，36g/L的黄芪注射液，3mL低、中、高剂量含三七总皂苷50，100，200mg／L血塞通混悬液进行共培养，并设未加入药物的单纯培养干细胞为空白对照组；隔日换液一次，连续培养3周。主要观察指标：培养3周后，倒置相差显微镜下观察细胞形态；流式细胞仪检测CD34^＋细胞百分比。结果：①骨髓间充质干细胞培养3周后贴壁细胞大部分呈梭形，束状排列，具有内皮细胞形态和特性。②与空白对照组比较，黄芪低、中剂量组和三七中、高剂量组CD34^＋细胞百分比显著增加（P〈0．05～0．01）。结论：黄芪、三七有促进骨髓间充质干细胞增殖并向血管内皮细胞分化的作用，此作用呈剂量依赖性。