白细胞介素10修饰树突状细胞在异基因肝肾联合移植大鼠体内迁移及免疫保护(英文)

摘要

背景：供体抗原递呈细胞迁移至受体，可能诱导受体T细胞对供体产生免疫耐受，导致移植物最终被接受。利用白细胞介素10（interleukin-10，IL-10）对供体树突状细胞进行修饰，使其保持在所需的分化状态，对提高肝肾联合移植的肾脏保护作用是一种有效策略。目的：观察经IL-10修饰的树突状细胞在肝肾联合移植大鼠体内的迁移情况，探讨其免疫保护的诱导作用。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2004-06／2006-02在中山大学医学院完成。材料：清洁级成年DA雄性供鼠、Lewis雌性受鼠各60只。受鼠随机分为3组：IL-10修饰细胞组、单纯细胞组、模型对照组，20只/组。方法：采用肝、肾联合法切取供体鼠的肝、肾，各组受体鼠均施行原位肝移植和原位左肾移植，建立肝肾联合移植免疫排斥模型。无菌状态下分离供体鼠的股骨和胫骨，用DMEM培养基冲出骨髓．去除红细胞后贴壁法分离培养树突状细胞，加入终浓度20μg／L的IL-10修饰72h，经阴茎背静脉输入IL-10修饰细胞组大鼠体内，2×10^7个细胞／只：单纯细胞组同法输入等量树突状细胞：模型对照组不给予任何干预措施。主要观察指标：肝肾联合移植后大鼠的生命体征、尿量及肝肾功能等指标的变化，病理组织学检测结果，原位杂交检测供体树突状细胞在受体鼠体内的分布。结果：单纯细胞组、模型对照组在移植后5～6d尿量均减至0mL，均呈重度急性排斥反应。IL-10修饰细胞组移植后2周内尿量维持在6-12mL，肝肾移植的急性排斥反应受到明显抑制，平均存活时间为（20．0±2．6）d，明最长于单纯细胞组、模型对照组，LogRank法检验P〈0．05。受体肠系膜淋巴结等组织内有较多Y染色体标记的树突状细胞迁入。结论：IL-10修饰的树突状细胞可以对联合移植的肝肾起到免疫保护作用；供体的成熟前期树突状细胞迁移到受体组织内，能够抑制肝肾联合移植急性排斥反应，并延长肝、肾移植物和受体大鼠的存活时间。