同种异体大鼠移植肺中转录因子T-bet和GATA结合蛋白3的定量表达

摘要

背景:急性排斥反应的发病机制主要是T细胞介导的免疫应答,Th1,Th2细胞及其分泌的细胞因子互相调节、交叉作用在其中起重要作用。研究表明,原始Th细胞向Th1或Th2细胞分化受转录因子T-bet和GATA结合蛋白3的表达所调控。目的:在前期实验基础上,应用实时荧光定量聚合酶链反应法测定大鼠移植肺组织中转录因子T-bet和GATA结合蛋白3的mRNA表达,初步分析转录因子T-bet和GATA结合蛋白3在肺移植急性排斥反应中的作用及其意义。设计、时间及地点:单一样本观察的随机对照动物实验,于2003-08/2008-04在瑞士苏黎世大学医院胸外科实验室和深圳市人民医院临床研究中心完成。材料:纳入LBNF1大鼠10只和Lewis大鼠30只,以建立大鼠左侧原位肺移植模型。方法:将大鼠按随机数字表法分为5组,以肺移植后3,5d作为观察急性排斥反应的时间点:①空白对照组(n=5):取正常Lewis大鼠左肺组织。②冷缺血对照组(n=5):冷低钾右旋糖酐液灌注后取Lewis大鼠右侧肺组织。③同系移植组(n=5):Lewis→Lewis大鼠肺移植后5d,取移植左肺组织。④同种异体移植3d组(n=4):LBNF1→Lewis大鼠肺移植后3d,取移植左肺组织。⑤同种异体移植5d组(n=6):LBNF1→Lewis大鼠肺移植后5d,取移植左肺组织。主要观察指标:应用实时荧光聚合酶链反应法,定量检测各组大鼠肺组织中转录因子T-bet和GATA结合蛋白3的表达。结果:①T-bet在同种异体移植5d组中的表达有所增高,但与其他各组间差异均无显著性意义(P>0.05)。②GATA结合蛋白3在同种异体移植5d组中的表达水平低于空白对照组、冷缺血对照组及同系移植组(P0.05)。结论:移植肺组织中GATA结合蛋白3比T-bet的改变更敏感,起主导作用;T-bet/GATA结合蛋白3比值可作为评价肺移植急性排斥反应的客观指标之一。