新生牛跟腱胶原蛋白海绵与动物肾、睾丸、皮肤细胞的生物相容性(英文)

摘要

背景：随着新生牛血清的产业化，新生牛跟腱资源大量积累，使得利用其制备医用胶原蛋白海绵并产业化成为可能。目的：采用新生牛跟腱制备胶原蛋白海绵，观察其与Vero细胞、天祝白牦牛胚胎皮肤细胞和岷县黑紫羔羊睾丸细胞的生物相容性。设计、时间、地点：重复测量观察，于2006-02／05在西北民族大学生命科学与工程学院生物工程与技术国家民委重点实验室完成。材料：用出生24h内的新生牛跟腱经冰醋酸、胃蛋白酶等消化，经盐析、透析及冻干等处理后，制成胶原蛋白海绵。天祝白牦牛胚胎皮肤f2代细胞和岷县黑紫羔羊睾丸f2代细胞为自制，Vero细胞为协和医科大学细胞中心提供。方法：在6孔板中，将3种细胞分别接种于经紫外线、臭氧灭菌后的胶原蛋白海绵上，于37℃、体积分数为0．05的CO2恒温箱培养，同时设对照实验。主要观察指标：相差显微镜观察接种5，12，24，72h时3种细胞在胶原蛋白海绵上和6孔板底的生长情况，接种11d对共培养物行考马斯亮蓝、苏木精-伊红染色。结果：接种后5h，在胶原蛋白海绵周围的6孔板底部可看到细胞已贴壁、伸展，个别细胞有分裂现象，在胶原蛋白海绵表面，隐约可见圆形细胞排列。接种后48～72h时，6孔板底部细胞铺满单层。接种后11d，考马斯亮蓝和苏木精-伊红染色显示3种共培养物中均有大量细胞良好生长，胶原海绵外观变得挺拔、透明、有韧性。结论：新生牛跟腱胶原蛋白海绵与上述3种来自不同动物、不同组织的细胞有很好的生物相容性，可做皮肤细胞、肾细胞和睾丸细胞的培养支架。