琼脂糖微囊化猪胰岛异种移植治疗糖尿病的实验观察

摘要

背景:以往研究表明体外琼脂糖微囊化成猪胰岛具有一定的有效生物活性。但移植到动物体内后的生物活性还有待明确。目的:观察实验性糖尿病大鼠腹腔内移植琼脂糖微囊化成猪胰岛治疗效果。设计、时间及地点:对比观察实验,于2007-12/2008-12在郑州大学中心实验室完成。材料:以琼脂糖作为制备微囊的材料,用相分离方法包被成猪胰岛。方法:①将纯化后未微囊化胰岛及微囊化胰岛分置于RPMI1640培养液培养,隔日换液。收集培养第1天及第5天培养液上清,检测胰岛素含量。②解剖镜下挑选同一时间微囊的胰岛细胞,分别置于5.6mmol/L葡萄糖、16.6mmol/L葡萄糖和10.0mmol/L茶碱溶液中,做静态孵育下的胰岛素刺激释放试验,放射免疫法测定胰岛素含量。③27只糖尿病大鼠随机分为3组:对照组、未微囊化胰岛移植组、微囊化胰岛移植组,分别注入生理盐水、(0.9～1.6)×103个未微囊化成猪胰岛、(0.8～1.7)×103个微囊化成猪胰岛。主要观察指标:微囊化胰岛培养液中基础胰岛素含量变化,微囊化胰岛对高糖与茶碱刺激的反应性,胰岛移植后糖尿病大鼠的生存期。结果:微囊化胰岛在1个月的培养期间可持续分泌胰岛素。囊内细胞生长良好,微囊没有溶解和破碎。培养2d的微囊化胰岛对高糖与茶碱刺激有明显反应,胰岛素释放量分别为低糖的1.96倍和2.58倍(P<0.01)。移植后7d时,3组血糖分别为(21.61±1.21)mmol/L,(19.11±2.39)mmol/L和(13.67±1.43)mmol/L,微囊化胰岛移植组与前2组相比差异均有显著性意义,且生存期明显长于前2组。结论:琼脂糖微囊化成猪胰岛可存活于糖尿病大鼠体内,并且具有有效生物活性。