蛋白激酶对内毒素休克后内皮细胞骨架的作用

摘要

目的 探讨内毒素休克发病机制中蛋白激酶G（PKG）的作用。 方法 用脂多糖 （LPS）刺激培养的内皮细胞 ,通过细胞裂解和离心获得细胞裂解液 ,用放射性同位素法标记法检测PKG的活性。同时采用特异性荧光染色法检测LPS刺激后细胞内肌动蛋白微丝 （F actin）的结构和分布变化。用PKG特异性抑制剂KT5 82 3预处理细胞后 ,再检测LPS介导的细胞内PKG活性和F actin的变化。以空白组为阴性对照 ,以PKG激动剂 8 Br cGMP刺激细胞作为阳性对照组。 结果 LPS分别刺激 5、10、30和 6 0min后细胞内PKG活力呈时间依赖性的增高 （与空白组相比P ＜0 .0 1） ,细胞内的F actin出现极性分布 ;而KT5 82 3预刺激 2 0min后再用LPS刺激没有出现上述变化。PKG的激动剂 8 Br cGMP刺激细胞后的变化与LPS的刺激相似。 结论 LPS可以介导血管内皮细胞PKG的激活和F actin的应力性变化 ;内毒素休克后内皮细胞通透性增高与cGMP PKG通路的激活有关。