生物活性玻璃-丝素蛋白复合膜支持人牙髓干细胞增殖与分化初探

摘要

目的探讨生物活性玻璃45S5-丝素蛋白（bioactive glass 45S5-silk fibroin,BG45S5-SF）复合膜对人牙髓干细胞（human dental pulp stem cell,hDPSC）生长、增殖、分化的影响,为牙髓-牙本质复合体再生提供新思路和新方法。方法制备纯丝素蛋白膜（蛋白膜组）、含不同质量浓度（1 000和5 000mg/L）BG45S5-SF复合膜（复合膜A组和B组）,以无材料膜的孔板为空白对照组。接触角仪测量蛋白膜组和复合膜组表面接触角（每组3个复孔）。4组预孵24 h后接种hDPSC,培养第4、7、14、21天检测hDPSC增殖能力;扫描电镜和免疫荧光染色观察hDPSC黏附和生长;碱性磷酸酶活性评估hDPSC分化潜能;实时定量PCR检测hDPSC的成牙本质细胞向分化基因表达水平。结果蛋白膜组、复合膜A组和B组表面接触角分别为89.51°±0.12°、70.32°±0.07°和71.31°±0.09°。hDPSC在丝素蛋白膜及BG45S5-SF复合膜上均黏附生长良好。复合膜A、B组第7、14、21天碱性磷酸酶活性及分化基因较空白对照组和蛋白膜组显著上调（P＜0.05）。复合膜A组牙本质基质蛋白1、牙本质涎蛋白、碱性磷酸酶、骨钙蛋白mRNA表达第14天达峰值,复合膜B组第21天达峰值;复合膜A、B组骨涎蛋白mRNA表达均在第21天达峰值。结论 BG45S5-SF复合膜不仅能支持hDPSC黏附、生长与增殖,还能促进hDPSC的成牙本质细胞向分化,提示BG45S5-SF复合膜有促进牙髓-牙本质复合体再生的潜能。