RNA干扰Tax基因表达对人嗜T淋巴细胞病毒Ⅰ型相关性脊髓病/热带痉挛性瘫痪患者细胞凋亡的影响

摘要

目的探讨RNA干扰Tax基因表达对人嗜T淋巴细胞病毒Ⅰ型相关性脊髓病/热带痉挛性瘫痪（HAM/TSP）患者细胞凋亡的影响。方法运用RNAi技术特异性干扰Tax基因的表达,流式细胞技术和western blot法鉴定Tax蛋白的表达情况,并运用流式细胞技术对干扰后的T淋巴细胞（TLC）凋亡情况及凋亡相关因子Fas、Bcl-2、肿瘤坏死因子α（TNF-α）进行检测。结果重组质粒psiTax/U6转染T细胞（9.84±3.32）%后,Tax蛋白的表达较未处理组（47.45±14.52）%和pSilencerl.0/U6转染组（45.98±10.66）%明显降低（t=9.51,14.93,均P＜0.01）;western blot法显示重组质粒psiTax/U6转染TLC后,Tax表达较pSilenc-er1.0/U6转染组明显降低;RNAi干扰组的凋亡率（21.55±1.37）%较未处理组（47.80±3.36）%显著降低（t=24.17,P＜0.01）;RNAi干扰组Fas,TNF-α显著降低（t=17.83,16.85,均P＜0.01）,而Bcl-2显著升高（t=5.21,P＜0.01）。结论运用RNA技术干扰Tax基因抑制Tax基因表达,可以有效抑制TLC细胞的凋亡。凋亡相关因子Fas,TNF-αand Bcl-2在此过程中发挥重要作用。