纳米佐剂N-2-HACC/CMCS对鸡新城疫病毒和H9禽流感病毒二联灭活疫苗免疫效果的评价

摘要

为了评估纳米佐剂N-2-HACC/CMCS在鸡新城疫病毒(NDV)和H9禽流感病毒(AIV)二联灭活疫苗中的免疫效果,本研究以N-2-HACC/CMCS为佐剂制备了鸡NDV和AIV二联灭活疫苗(N-2-HACC/CMCS NDV+H9AIV二联灭活疫苗,简称为佐剂二联灭活疫苗),根据现行《中国兽药典》要求对制备的疫苗进行了外观、剂型、稳定性、无菌和安全性的检测后又评价了该疫苗的免疫效果。即将50只3日龄SPF鸡分为5组,分别为0.2 mL佐剂二联灭活疫苗组、0.2 mL商品二联灭活疫苗组、0.3 mL佐剂二联灭活疫苗组、0.3 mL商品二联灭活疫苗组及空白对照组,免疫后不同时间采血,采用血凝抑制试验和ELISA方法分别检测各组鸡血清中的NDV和AIV HI抗体效价以及细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-4)的分泌水平。并根据抗体检测结果分析免疫剂量与HI抗体效价和细胞因子的相关性。结果显示,无论是0.2 mL还是0.3 mL的免疫剂量,佐剂二联灭活疫苗免疫鸡血清中NDV和AIV HI抗体效价均极显著高于商品二联灭活疫苗组鸡(P<0.01);商品二联灭活疫苗免疫鸡产生的NDV和AIV HI抗体效价与免疫剂量呈正相关,而佐剂二联灭活疫苗免疫鸡产生的NDV和AIV HI抗体效价与免疫剂量无相关性;细胞因子检测结果显示,免疫后21 d,0.2 mL佐剂二联灭活疫苗和商品二联灭活疫苗免疫鸡血清中的IFN-γ、IL-2、IL-4含量均极显著高于各疫苗免疫后7 d和14 d各组鸡血清中的各细胞因子(P<0.01),而免疫后21 d,0.3 mL上述两种二联灭活疫苗免疫鸡血清中的细胞因子含量与免疫后7 d和14 d相应组鸡的细胞因子含量相比无明显升高,其中免疫0.2 mL佐剂二联灭活疫苗产生的IFN-γ、IL-2、IL-4水平最高。本研究结果首次证实N-2-HACC/CMCS不仅可以提高免疫鸡血清中NDV和AIV HI抗体效价,而且还可以减少疫苗中的抗原用量。本研究为N-2-HACC/CMCS作为疫苗佐剂在NDV和H9 AIV等灭活疫苗中的应用奠定了实验基础。